Recoltarea corecta

RECOLTAREA CORECTA

Hemograma se recolteaza din vena pe nemancate la prima ora sau, in ambulator , dupa un mic dejun usor. In spital dimineata in pat.  Efortul datorat digestiei modifica rezultatul mai putin decat efortul deplasarii la laborator.

Sangele venos - pe anticoagulant uscat:

Na₂EDTA sau K₂ EDTA

2mg/ml - 2g Na₂EDTA in 1ml apa distilata.

0,2 ml solutie (4mg Na₂EDTA)  care se usuca + 2ml sange.

Flacoanele se usuca in termostat la 45^oC.

Punctia venoasa netraumatizanta pentru ca antreneaza celulele epiteliale (se confunda cu microcitele). Flacoanele se rastoarna pentru omogenizare de 5-10 ori prin rasturnari lente, pentru a se evita aglutinarea trombocitelor. Frotiul de sange se realizeaza repede in 90 minute. Sangele se poate pastra 24h la 4^oC iar pentru hemoblobina pina la 1 saptamana.

Sangele capilar - deget, ureche , calcai, intepare profunda pentru formarea picaturii spontan (fara stoarcere). Pielea trebuie sa fie uscata pentru a evita hemoliza, se indeparteaza prima picatura de sange.

Indicatii:    1) copii

2) pentru morfologie buna

3) cand nu sunt prezente sticlute

4) pentru aprecierea morfologiei.

Valori normale

Hematocrit: - primele zile 45-60%

- 15 zile - 6 luni - 36-45%

- 6 luni - 2 ani -35-36%

- 2 ani - 15 ani -36-39%

Adulti:  - femei - 36-42%

- barbati 40-48%

Hemoglobina - femei - 11-15g/dl

- barbati 13-17g/dl

VSH -ul - reactia de disproteinemie. Se recolteaza pe citrat disodic 0,4 citrat+1,6 ml sange.

Valori normale: - femei  3 - 8 div/h

- barbati 6 - 11 div/h

VSH-ul creste in infectii acute si cronice, tumori maligne, nefroze, boli de colagen, hemopatii. In anemie VSH-ul creste iar in sarcina VSH-ul creste.VSH-ul se lucreaza in primele 4-5 ore, apoi valorile scad cu 20%.

Reticulocitele

Reticulocitele se coloreaza cu albastru de crezyl brilliant .

1pic. +1pic. colorant se amesteca si se lasa 5 minute pe lama.

V.N: 0,5-1,5%.

Picatura groasa

Se defribineaza cu colt de lama. Se hemolizeaza cu apa distilata sau cu apa distilata +acid acetic glacial. Colorare cu Giemsa extemporaneu (3 picaturi Giemsa la 1ml AD) timp de 20 de minute.

Frotiul - uscare rapida in aproximativ 45 de minute.

Fixare - acool metilic (3-5 minute), alcool etilic (15 minute), Mac Grunwald Giemsa (2-3 minute) (1 - 2 picaturi la 1 ml AD).

Se lasa 25-30 de minute, apoi se spala la jet de apa.

Coloratia Mac Grunwald Giemsa rapida

2 picaturi alcool metilic +1 parte Giemsa nediluat timp de 30 minute + AD neutra care se amesteca cu colorantul cu pipeta Pasteur.

Frotiul - rosu - pH-ul solutiei finale este acid.

albastru - pH-ul alcalin - sau supracolorat

precipitate - frotiul s-a uscat sau a fost insuficient spalat.

Concentratul leucocitar

Na₂EDTA sau K₂ EDTA 5g / 10 ml ser fiziologic .

1 ml +9 ml sange

Se impinge substratul si se transvezeaza stratul trombocitar, lerucocitat, plasma se centrifugheaza 10 minute la 2000 ture , apoi se decanteaza plasma si se intind frotiuri subtiri.

Celulele lupice - 10 ml singe venos in balonas cu 10-12 perle , se agita timp de 15 minute. Se lasa in eprubete 2-3 ore apoi se aseaza supernatantul, se centrifugheaza si se trag frotiuri subtiri.